紫花苜蓿MsCOL1基因RNAi表达载体的构建及转化

作者：周光辉; 杨青川; 张铁军; 晁跃辉; 金洪

来源：中国草地学报, 2013, (04): 7-12+18.

• 紫花苜蓿
• RNAi
• 转基因
• MsCOL1 Alfalfa
• RNAi
• Transgene
• MsCOL1

根据紫花苜蓿CONSTANS类似基因MsCOL1基因(登录号:DQ661682)序列,设计含有酶切位点的两对特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建含有发夹结构的RNAi载体pART-S-A。利用农杆菌介导方法,将pART-S-A转化到紫花苜蓿中,经PCR检测,获得了7株转基因植株。经RT-PCR检测,证明转基因植株中MsCOL1基因表达量有所下降,其中5株的表达量明显的降低。结果表明,已构建成功具有发夹结构的RNAi载体pART-S-A,它可有效的抑制紫花苜蓿MsCOL1基因。

• 单位
  内蒙古农业大学; 中国农业科学院