摘要
目的:探讨miR-497-3p、Beclin1在运动性心肌肥大大鼠心肌中的表达变化,及其对运动性心肌肥大发生和发展的影响。方法:选取Sprague-Dawley纯系6周龄雄性大鼠24只,随机分为安静对照组(Con组,n=12)和运动性心肌肥大模型组(Ex组,n=12)。运动性心肌肥大模型组大鼠参照Femandes和Oliveria等制定10周游泳运动训练方案,建立大鼠运动性心肌肥大模型。采用RT-qPCR检测miR-497-3p、心钠素(ANP)、心肌肌球蛋白重链α和β(α-MHC、β-MHC)、α-肌动蛋白(α-actin)、肌浆网钙ATP酶(SERCA2α)及Beclin1的mRNA表达水平,用Western blotting检测自噬相关基因Beclin1的蛋白表达水平。分别用过表达及干扰表达miR-497-3p腺病毒感染H9C2细胞,观察Beclin1的mRNA及蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证Beclin1与miR-497-3p的靶向关系。结果:(1)10周游泳运动干预后,Ex组较Con组miR-497-3p表达量显著下降(P<0.01)。(2)10周游泳运动干预后,Ex组较Con组自噬相关蛋白Beclin1的mRNA、蛋白表达水平均显著升高(均P<0.01)。(3)过表达miR-497-3p抑制了自噬相关基因Beclin1的表达(P<0.01),引起心肌自噬水平降低。(4)干扰表达miR-497-3p后,Beclin1 mRNA和蛋白的水平显著上调(均P<0.01)。(5)Beclin1是miR-497-3p的靶基因。结论:10周游泳训练可以通过降低心肌中miR-497-3p的表达,靶向上调Beclin1表达水平,进而引起心肌自噬水平增强,从而诱导运动性心肌肥大形成。
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单位濮阳医学高等专科学校; 上海师范大学