鼻咽癌组织中细胞焦亡相关蛋白NLRP3/Caspase-1/GSDMD表达以及同复发转移关系研究

作者：刘丹; 万浪; 彭聪^*; 岑瑞祥; 徐芬

来源：中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2023, 58(12).

• 鼻咽肿瘤
• NLRP3
• Caspase-1
• GSDMD
• 细胞焦亡
• 复发
• 转移

目的探究NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor protein 3, NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶1(cysteine-aspartic acid protease 1, Caspase-1)和消皮素D(Gasdermin D, GSDMD)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)中的表达以及其同NPC复发转移的关系。方法回顾性分析2014年12月至2020年1月黄石市中心医院确诊为NPC的421例病例资料, 其中男262例, 女159例, 年龄18～88岁。通过免疫组化和多重免疫荧光染色法观察NLRP3、Caspase-1和GSDMD在病理标本中的表达。结合随访资料, 应用单因素和多因素Cox回归分析NPC复发转移的影响因素。此外, 使用NPC细胞系HNE-2进行体外实验, 探究NLRP3、Caspase-1和GSDMD的功能机制。结果多因素分析显示, Ⅲ～Ⅳ期肿瘤分期(HR复发=2.74, 95%CI复发:1.61～4.65;HR转移=1.90, 95%CI转移:1.04～3.49)和治疗前血浆EBV-DNA≥1 500 copies/ml(HR复发=1.91, 95%CI复发:1.13～3.23;HR转移=2.07, 95%CI转移:1.23～3.50)是NPC患者发生复发和转移的独立危险因子, 而NLRP3(HR复发=0.17, 95%CI复发:0.08～0.35;HR转移=0.30, 95%CI转移:0.15～0.59)、Caspase-1(HR复发=0.32, 95%CI复发:0.18～0.59;HR转移=0.43, 95%CI转移:0.25～0.76)和GSDMD(HR复发=0.48, 95%CI复发:0.25～0.91;HR转移=0.96, 95%CI转移:0.53～1.74)的阳性表达则是独立保护因子;年龄(HR=1.02, 95%CI:1.01～1.04)和调强放疗(HR=0.51, 95%CI:0.30～0.88)是NPC患者复发独立影响因子, 化疗(HR=0.50, 95%CI:0.29～0.88)则是NPC转移的独立保护因子(P值均<0.05)。三者阳性表达的NPC患者局部-区域性无复发生存期、远处无转移生存期以及总生存期均高于三者阴性表达者(P值均<0.05)。体外实验中, 蛋白免疫印迹法(WB)分析揭示, NLRP3的过表达可以激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路。酶联免疫吸附试验和扫描电镜显示, NLRP3的过表达能促进HNE-2细胞的焦亡。细胞功能分析进一步证实, NLRP3的过表达能显著抑制HNE-2细胞的增殖、侵袭和转移能力。结论 NLRP3、Caspase-1和GSDMD表达阳性是NPC患者复发转移的独立保护因子, 能够通过促进细胞焦亡发生而抑制NPC增殖、侵袭和转移。

• 单位
  湖北理工学院; 黄石市中心医院; 贵州省人民医院