登革病毒2型非结构蛋白NS2B的原核表达、纯化及其抗体的制备

作者：刘丽梅; 陈宗涛; 田衍平; 陈炜; 江雯; 徐小峰; 高娜; 安静

来源：免疫学杂志, 2008, (02): 135-138.

DOI：10.3969/j.issn.1000-8861.2008.02.005

• 登革病毒
• Nonstructural Protein 2B(NS2B)
• 原核表达载体
• 纯化蛋白
• 多克隆抗体

目的原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体。方法RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,Western-blot及免疫荧光染色检测其特异性。结果成功构建原核表达载体pQE-31/NS2B,进一步获得相对分子质量为16000的纯化蛋白及多克隆抗体,ELISA显示抗体效价达1∶25600。Western-blot和免疫荧光染色显示多克隆抗体与NS2B蛋白特异性结合。结论本研究获得了纯化的DV2NS2B蛋白,成功地制备了NS2B多克隆抗体,为进一步研究NS2B的作用机制奠定了基础。

• 单位
  基础医学院; 第三军医大学; 首都医科大学