Mycobacterium sp.LY-1高效转化植物甾醇两相体系的构建

作者：许桠楠; 李会^*; 周龙飞; 张杰; 陈立营; 史劲松; 许正宏

来源：应用与环境生物学报, 2020, 26(04): 747-752.

DOI：10.19675/j.cnki.1006-687x.2020.01035

• Mycobacterium sp. LY-1
• 两相转化体系
• 9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮
• 细胞膜结构抑制剂
• 正交优化

9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮(9α-OH-AD)是一种卤代皮质类激素的重要前体,具有重要的商用价值.为进一步提高目的产物9α-OH-AD的产量,在本实验室前期利用非离子表面活性剂壬基酚乙氧乙烯醚(TX-40)替代大豆油进行Mycobacterium sp. LY-1转化植物甾醇的基础上,通过考察16种助溶剂与TX-40复配对菌株LY-1转化植物甾醇生产9α-OH-AD的影响,确定最适助溶剂为司盘-20.通过正交优化实验确定司盘-20的最优添加浓度为0.1%.进一步考察不同浓度细胞膜结构抑制剂甘氨酸、鱼精蛋白、异烟肼对菌株LY-1转化植物甾醇的影响,结果显示在以上转化体系中添加1.0μg/mL的鱼精蛋白时,9α-OH-AD的摩尔得率最高,达到46.4%.最终确定菌株LY-1降解植物甾醇的两相转化体系为TX-40 0.7%,司盘-20 0.1%,鱼精蛋白1.0μg/mL.该体系于植物甾醇的投料浓度提高至35 g/L时,目的产物9α-OH-AD的摩尔得率仍能稳定在32.5%以上.本研究成功构建了Mycobacterium sp. LY-1高效转化植物甾醇的两相体系,结果可为其工业化应用奠定良好基础.(图4表2参26)

• 单位
  生物工程学院; 江南大学; 天津天药药业股份有限公司; 工业生物技术教育部重点实验室