一种利用分泌型荧光素酶基因表达变化监测活细胞中miRNA活性的新方法

作者：田文洪; 董小岩; 王刚; 吴小兵

来源：生物工程学报, 2010, (06): 809-816.

DOI：10.13345/j.cjb.2010.06.007

• miRNA
• miRNA活性
• Gsensor
• 监测 miRNA
• miRNA activity
• monitor

建立了一种以分泌型的荧光素酶Gluc为报告基因的miRNA传感器质粒(命名为Gsensor)监测活细胞中miRNA(microRNA)活性的方法。首先构建了pAAV2neo-Gluc-MCS-polyA质粒作为Gsensor的空载体,同时其中的MCS位点可供插入miRNA的靶序列。以miR142-3p为检测对象,将1个和3个拷贝的与miR142-3p完全互补靶序列分别插入pAAV2neo-Gluc-MCS-polyA中,构建成miR142-3p Gsensor和miR142-3p Gsensor-3。将它们分别转染至U937细胞中,检测培养上清中Gluc的表达水平。结果显示二者均可有效反映U9...

• 单位
  北京五加和分子医学研究所有限公司; 复旦大学; 生命科学学院; 遗传工程国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所