Marc-145细胞微载体悬浮培养消化放大技术研究

作者：尹茉莉; 张爽; 王振军; 冯二凯; 冷雪; 王会岩^*; 李艳; 孙美艳

来源：黑龙江畜牧兽医, 2019, (13): 16-172.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.07.0155

• Marc-145细胞
• 生物反应器
• 微载体
• 胰蛋白酶
• 放大技术
• 猪繁殖与呼吸综合征病毒

为了建立Marc-145细胞微载体培养放大技术,使其用于猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)疫苗的规模化生产,试验在7 L生物反应器内微载体培养Marc-145种子细胞,再用胰蛋白酶消化,然后进行逐级放大培养,并通过细胞最佳消化状态试验、保留胰蛋白酶消化液的影响试验、测试回收微载体试验等方法摸索胰蛋白酶消化放大技术参数。结果表明:Marc-145细胞在初级生物反应器内培养时,微载体使用量为5 g/L,细胞密度达3.18×106个/mL,并且在状态饱满时进行消化放大;在14 L生物反应器内培养时,Marc-145细胞均匀分布在微载体上并且代谢旺盛,在细胞密度为2.91×106个/mL时进行14 L消化放大;在14 L生物反应器内培养Marc-145细胞时,采用批培养方式,细胞比生长速率最大达0.031/h,在培养96小时时细胞密度达2.37×106个/mL。说明试验成功建立了生物反应器微载体培养Marc-145细胞的胰蛋白酶消化放大技术,并实现了逐级放大。

• 单位
  吉林农业大学; 吉林医药学院; 中国农业科学院特产研究所