数字PCR技术及在病原微生物检测中的应用

作者：张瑾; 张娟; 徐翮飞; 朱可; 陈晓光; 薛晓宁

来源：口岸卫生控制, 2019, 24(05): 16-20.

• 数字PCR
• 病原微生物
• 检测

数字聚合酶链式反应(digital polymerase chain reaction,dPCR)是继普通PCR和实时荧光定量PCR (quantitative polymerase chain reaction,qPCR)之后的第三代PCR技术,是一项基于单分子目标基因PCR扩增的绝对定量技术。dPCR以微流控和微滴化为基础,将大量稀释后的核酸分散至数百到数万计的微滴中,每个反应室中的单拷贝核酸进行独立的荧光PCR扩增,通过逐个检测并统计反应室中阳性和阴性反应的数量单元,并根据泊松分布的统计学原理进行校正,最终计算出初始样品中目标核酸的精确拷贝数。与传统PCR技术相比,dPCR具有高灵敏度、高精确度、高耐受性和绝对定量的优点。近年来dPCR技术飞速发展,已经广泛应用于生命科学领域。本文对dPCR技术及在感染性疾病病原微生物检测方面的应用进行了综述。