甲型流感病毒在MDCK细胞上培养条件的优化

作者：赵晓辉; 周大宇

来源：卫生研究, 2014, 43(02): 210-218.

DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2014.02.008

• 甲型流感病毒
• MDCK细胞
• 分离培养

目的优化甲型流感病毒在MDCK细胞上的培养条件,提高甲型流感病毒的分离率和监测效果。方法将三种甲型流感病毒液(甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2)分别接种于MDCK细胞,通过比较不同的病毒接种量(25、50、75、100、125和150μl/cm2)、不同的TPCK-胰酶添加浓度(1.0、1.5、2.0、2.5、3.0和3.5μg/ml)以及不同的MDCK细胞增毒代次(连续盲传四代),对三种甲型流感病毒易感性的影响,确定其最佳分离效果。结果三种甲型流感病毒:甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2的最佳病毒接种量分别为:100、75和75μl/cm2;胰酶最佳使用浓度分别为2.5、2.0和2.0μg/ml;最适宜的细胞增毒传代次数为:一代、二代、二代;低代次的MDCK细胞对甲型H1N1流感病毒的易感性高于季节性H1N1和季节性H3N2;甲型H1N1流感在培养后病毒的HA滴度低于季节性H1N1与季节性H3N2。结论甲型H1N1流感病毒在MDCK细胞上的分离效果低于季节性H1N1与季节性H3N2;季节性H1N1流感病毒和季节性H3N2流感病毒的分离条件基本相同。

• 单位
  辽宁医学院附属第一医院