保存条件对恒河猴CD8+T细胞活性的影响

作者：罗嘉慧; 卢秋翰; 李国萃; 张京京; 丛喆^*; 魏强^*

来源：中国比较医学杂志, 2021, 31(04): 33-37.

• 细胞内细胞因子染色
• +T细胞" name="keyword">CD8+T细胞
• 细胞活性
• 恒河猴

目的通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining, ICS)检测CD8+T细胞反应强度,探究不同保存条件对CD8+T细胞活性影响。方法采集9只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至-80℃和液氮,冻存1周和1年再用于检测,检测时用阳性刺激物进行刺激,流式分析活细胞比例,MIP-1β、TNF-α、IL-2、IFN-γ四种细胞因子分泌情况和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况。结果随着冻存时间的增加,细胞存活率降低,且液氮冻存比-80℃冻存有更高的存活率。在细胞因子分泌和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况中,冻存一年的细胞MIP-1β、TNF-α分泌量显著高于正常细胞,细胞状态发生了改变,冻存一周的细胞与新鲜细胞状态更为相近。结论想要保持低的细胞死亡率和正常的CD8+T细胞反应,应使用新鲜细胞或短期冻存的细胞进行测量CD8+T细胞反应水平的实验。

• 单位
  中国医学科学院医学实验动物研究所; 国家中医药管理局; 北京协和医学院