激活骨髓基质细胞Notch信号体外促进小鼠成骨作用

作者：刘忻钰; 罗岑; 涂小林^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(12): 1097-1103.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009508

• 骨髓基质细胞(BMSC)
• Notch信号
• 成骨分化

目的 探究体外激活骨髓基质细胞(BMSC)缺刻基因(Notch)信号对成骨分化的影响。方法 使用Cre重组腺病毒(Ad-Cre)以及对照腺病毒(Ad-GFP),分别感染Notch1-NICDflox/flox小鼠BMSC,分为Ad-Cre组和Ad-GFP组。Western blot法检测Notch1-NICD蛋白表达水平；碱性磷酸酶(ALP)染色及生化定量检测早期成骨分化水平，茜素红S染色及矿化定量检测晚期钙盐沉积水平；实时荧光定量PCR检测Notch靶基因发状分裂增强子1(Hes1)、含YRPW基序的bHLH转录因子Hes相关家族1(Hey1)、 Hey2、 HeyL、成骨标志基因ALP、 Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨转化因子(Osx)、骨钙素(Ocn)以及促血管生成因子血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达。结果 Ad-Cre成功激活Notch1-NICDflox/flox小鼠BMSC中的Notch信号；Ad-Cre组的ALP活性相较Ad-GFP组明显升高，晚期钙盐沉积水平明显升高；ALP、 RUNX2、 Osx、 Ocn和VEGF、 HIF-1α的表达显著增加。结论 体外激活小鼠BMSC的Notch信号显著促进成骨分化。

• 单位
  生命科学研究院; 重庆医科大学