棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7基因的克隆与融合表达

作者：马彩霞; 李梅; 邱星辉; 何凤琴; 刘惠霞

来源：昆虫学报, 2006, 49(06): 944-949.

DOI：10.3321/j.issn:0454-6296.2006.06.009

• 棉铃虫
• 细胞色素P450
• CYP6B7
• 基因克隆
• 融合表达 Helicoverpa armigera
• cytochrome P450
• CYP6B7
• gene cloning
• fusion expression

细胞色素P450CYP6B7被推测与棉铃虫Helicoverpa armigera对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性有关,但至今尚无CYP6B7参与杀虫剂代谢方面的直接证据。为揭示CYP6B7的代谢功能,作者以棉铃虫幼虫基因组DNA为模板,以CYP6B7基因设计特异性引物,扩增出包含321bp内含子的CYP6B7基因。用反向PCR的方法消除内含子,获得包含完整的CYP6B7基因的开放阅读框。将CYP6B7基因与pMAL-c2X载体连接,并转化E.coliTB1细胞,在IPTG诱导下,CYP6B7能与载体基因编码的麦芽糖结合蛋白(MBP)在大肠杆菌中融合表达,表达产物经直链淀粉(amylose)柱亲和层...

• 单位
  农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室; 西北农林科技大学; 中国科学院动物研究所