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摘要
目的应用性状观察和DNA条形码技术对我国主要的海马养殖品种直立海马进行研究,明确其性状和分子的鉴定特征,探索多基原品种海马类药材鉴定的新方法。方法结合文献和样品观察,总结直立海马的典型性状鉴别特征,提取直立海马及其他正伪品海马药材的基因组总DNA,对其COI和ATP6基因序列进行PCR扩增和双向测序,利用MEGA 7软件对序列组成、变异位点和种内种间遗传距离进行分析,构建NJ系统发育树比较COI和ATP6基因分子鉴定结果的准确性。结果直立海马的典型性状特征包括短吻、宽腹以及第1, 3, 5, 7节明显增大的躯干环。直立海马药材的COI和ATP6基因均可以成功扩增并可获得高质量序列,其扩增序列的长度分别为649～650 bp和603～604 bp,GC碱基平均含量分别为42.69%和39.67%,具有一定的碱基偏好性;直立海马COI和ATP6基因的种内最大K2P遗传距离远小于其与其他正伪品海马药材的种间最小K2P遗传距离,COI和ATP6基因构建的NJ树显示直立海马与其他海马药材各自聚为一支,表明不同的海马药材之间可明显区分。结论性状鉴别与DNA条形码联用的方法可以获得直立海马的典型性状和分子鉴别特征,准确区别直立海马和市场上常见的7种正伪品海马药材,为多基原的海马类药材的品种鉴定提供了参考和依据,为直立海马的后续开发和利用提供了技术保障。
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单位浙江中医药大学; 第一临床医学院
