摘要
目的观察鼻咽癌组织和细胞株中环状RNA(circular RNA,circRNA)BCRC-3的表达,探讨环状RNA BCRC-3对细胞周期依赖性激酶抑制蛋白B(cyclin dependent kinase inhibitors B,DKNIB)基因表达的调控及对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响。方法 荧光实时定量聚合酶链式反应(qPCR)分别检测circRNA BCRC-3在83例鼻咽癌组织及62例慢性鼻咽炎组织、鼻咽癌细胞株及人永生化鼻咽上皮细胞中的表达。以circRNA BCRC-3表达最低的细胞株为转染对象,分别转染阴性对照质粒(对照组)或载有circRNA BCRC-3序列的质粒(实验组)。MTS法和细胞划痕实验分别检测上调circRNA BCRC-3对细胞增殖和迁移能力的影响。qPCR检测上调环状RNA BCRC-3对DKNIB基因mRNA表达的影响,Western blot检测DKNIB蛋白和PI3K/AKT信号通路蛋白的表达。结果 与慢性鼻咽炎组织相比,circRNA BCRC-3在鼻咽癌组织中表达显著降低(P<0.01)。与人永生化鼻咽上皮细胞相比,环状RNA BCRC-3在鼻咽癌细胞株中表达显著降低(P<0.01),在HONE-1细胞中的表达最少(P<0.01)。与对照组比较,实验组HONE-1细胞增殖能力从第2天开始明显下降(P<0.05),HONE-1细胞迁移能力明显降低(P<0.01),HONE-1细胞中DKNIB在mRNA和蛋白水平的表达明显上升(P<0.01),PI3K/AKT信号通路蛋白PIP3、PDK1、p-AKT和AS160表达明显下降。结论 circRNA BCRC-3在鼻咽癌组织和细胞株中呈低表达,上调circRNA BCRC-3可抑制鼻咽癌HONE-1细胞的增殖和迁移能力,其机制可能是circRNA BCRC-3通过上调DKNIB基因表达,抑制PI3K/AKT信号通路转导。
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单位郑州大学第一附属医院; 南阳市中心医院