摘要
目的 对生物反应器悬浮培养禽偏肺病毒(avian metapneumovirus,aMPV)制备弱毒疫苗的工艺进行优化。方法 采用分批培养的方法优化悬浮BHK-21细胞在生物反应器内培养及aMPV增殖工艺,并对制备的疫苗进行动物安全性及攻毒保护试验。结果 采用1.0×10~6cells/mL的初始接种密度培养BHK-21悬浮细胞,细胞能快速度过延滞期进入对数生长期,培养72 h细胞密度可达1.6×10~7cells/mL。调整细胞密度为3.0×10~6cells/mL,按照感染复数MOI=0.1的剂量接种病毒,病毒含量可达108.67TCID50/mL。制备的疫苗安全性良好,可有效保护番鸭,保护率为100%。结论 优化了生物反应器培养aMPV的工艺,可获得较高的病毒效价,为aMPV疫苗的规模化生产提供了参考。
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