鸽肠杆菌i ss基因的LAMP检测

作者：李雪雁^*; 刘琪; 梁慧仪; 江奕容; 林晓霜

来源：当代畜牧, 2018, (30): 28-31.

• 肠杆菌
• 鸽
• iss基因
• 环介导等温扩增

针对鸽肠杆菌的传统检测方法检测周期长的问题,笔者建立了快速检测鸽肠杆菌的环介导等温扩增(LAMP)法。笔者以肠杆菌属毒力标志基因(iss基因)的保守区域设计4条特异性LAMP引物,分别进行了反应条件的优化、灵敏度试验、特异性试验、限制性内切酶试验。结果显示,其最优的体系中甜菜碱浓度为1.6 mol/L,Mg SO4浓度为2.5 mmol/L,内外引物浓度比FIP∶BIP∶F3∶B3=3∶3∶1∶1。将所有反应混合物置于63℃恒温反应40 min就能完成对iss基因的扩增,肉眼可观察检验结果。该方法具有良好的特异性,灵敏度是PCR的1000倍。这是一种快速、特异、灵敏的肠杆菌属iss基因LAMP检测方法,其适用于基层和现场检测。

• 单位
  电子科技大学中山学院