电针调节AKT/NF-κB信号通路炎症反应修复受损肠黏膜屏障的机制研究

作者:张玉洁; 裴丽霞; 周俊灵; 吴晓亮; 陈璐; 郭静; 孙梦珠; 孙建华*
来源:中医药信息, 2021, 38(07): 9-17.
DOI:10.19656/j.cnki.1002-2406.20210702

摘要

目的:观察电针"天枢""足三里"对缓解肠易激模型小鼠AKT/NF-κB信号通路相关炎症因子的调节及对肠屏障蛋白Claudin1、Occludin、ZO-1的影响,探讨电针修复肠黏膜屏障的潜在机制。方法:将30只10周龄雄性c57小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。以避水应激法(WAS)造成的肠易激小鼠为模型,结合电针组给予0.5~1.0 m A,2 Hz/15 Hz,疏密波干预双侧"天枢""足三里",1次/d,每次15 min,共10 d。观察腹壁回撤反应(AWR)评分,HE染色法观察结肠组织形态,Westen Blot法和荧光定量PCR法检测结肠组织中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化(p)-AKT、核因子κBp65(NF-κBp65)、磷酸化(p)-NF-κBp65、IKKα、IKKβ、Claudin1、Occludin、ZO-1蛋白的相对表达量。ELISA法检测血清中的白介素-1β(IL-1β)、白介素-6α(IL-6α)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达量。结果:与对照组相比较,模型组AWR评分增高(均P<0.05),AKT、p-AKT、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKKα、IKKβ蛋白和mRNA的相对表达量升高(P<0.01),Claudin1、Occludin、ZO-1 mRNA相对表达量减少(P<0.01),与模型组比较,电针干预后AWR评分降低(均P<0.05),AKT、p-AKT、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKKα、IKKβ蛋白和mRNA的相对表达量升高(P<0.01)。模型组与对照组相比,结肠组织Westen Blot检测AKT、p-AKT、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKKα、IKKβ、Claudin1、Occludin和ZO-1蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.01);治疗组与模型组相比,AKT、p-AKT、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKKα、IKKβ、Claudin1和Occludin蛋白表达有所降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。小鼠结肠组织荧光定量PCR法检测结果显示,模型组与对照组相比,AKT、p-AKT、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKKα、IKKβ、Claudin1、Occludin和ZO-1 mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.001);治疗组与模型组相比,AKT、p-AKT、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKKα、IKKβ、Claudin1、Occludin mRNA表达降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。模型组与对照组Elisa结果相比,IL-6α、IL-1β和TNF-α表达差异具有统计学意义(P<0.001);治疗组与模型组相比,IL-6α、IL-1β和TNF-α表达有所降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:电针可能通过调节AKT/NF-κB信号通路缓解炎症反应恢复受损的肠黏膜屏障。

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