摘要
目的:探讨NPRL2对人结肠癌细胞自噬的影响,并进一步探讨自噬和凋亡的关系。方法:构建过表达NPRL2慢病毒载体,转染至HT29细胞。检测转染48 h后NPRL2、LC3B和p62蛋白表达量,吖啶橙染色检测细胞自噬。用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理转染后细胞,测定细胞增殖,细胞死亡,细胞caspase-3活性,细胞凋亡和caspase-3、Bax、Bcl-2、LC3B及p62的蛋白表达量,吖啶橙染色检测细胞自噬。结果:免疫印迹法检测结果表明NPRL2能够激活HT29细胞的自噬。前期研究结果表明,NPRL2能够促进HT29细胞凋亡。进一步研究NPRL2激活的自噬与凋亡之间的关系,结果表明3-MA抑制由NPRL2诱导的自噬,降低细胞活力,抑制其增殖,促进其凋亡,并促进活化caspase-3和Bax的表达,抑制Bcl-2的蛋白表达和细胞自噬。结论:NPRL2能够促进HT29细胞的自噬,但这种自噬抑制了NPRL2引起的细胞凋亡,通过抑制3-MA抑制NPRL2引起的自噬能够有效地促进结肠癌细胞的凋亡。
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