siCBP慢病毒降低大鼠原代海马神经元乙酰化组蛋白表达

作者：侯娜丽; 吴小凤; 任兰; 郭敏; 毕杨; 刘友学; 陈洁; 黄鸿眉; 李廷玉

来源：生物医学工程学杂志, 2015, 32(04): 838-846.

DOI：10.7507/1001-5515.20150151

• 环磷酸腺苷反应元件结合因子的结合蛋白
• 慢病毒载体
• siRNA
• 海马神经元
• 组蛋白乙酰化

本研究目的为构建携带针对大鼠环磷酸腺苷反应元件结合因子的结合蛋白(CBP)基因的siRNA重组慢病毒,感染原代海马神经元并检测其对乙酰化组蛋白表达的抑制作用。本文构建了4种siCBP,并检测其对神经元中CBP表达的抑制作用,选择效果最好的一种检测神经元中HAT活性及乙酰化组蛋白Ac-H3、Ac-H4的表达。酶切及测序鉴定证实siCBP正确克隆至慢病毒质粒中,4种siCBP感染原代海马神经元后CBP mRNA和蛋白表达有不同程度降低,效果最佳的GR806对神经元的HAT活性及Ac-H3、Ac-H4表达均有显著抑制作用。本研究为后续应用siCBP阐明CBP依赖的组蛋白乙酰化对海马区学习记忆功能调节的相关分子机制提供了实验工具。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院