Nesprin蛋白对骨髓间充质干细胞的影响

作者：杨文钢; 薛松; 连锋; 汪永义; 胡振雷; 朱洪生

来源：中国胸心血管外科临床杂志, 2012, 19(04): 408-413.

• Nesprin蛋白
• 骨髓间充质干细胞
• 细胞增殖
• 慢病毒载体 Nesprin protein
• Bone marrow mesenchymal stem cells
• Cell proliferation
• Lentivirus vector

目的构建nesprin蛋白siRNA慢病毒载体(LV-siNesprin),感染骨髓间充质干细胞(MSCs),观察nesprin蛋白对MSCs的影响。方法针对nesprin靶基因序列设计并合成4对miRNA oligo,并将4对oligo退火成双链DNA,测序鉴定。将4种miRNA干扰质粒(SR-1、SR-2、SR-3、SR-4)转入大鼠血管平滑肌细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blotting)检测干扰效应,筛选最佳干扰序列;将最佳干扰序列和pDONR221载体进行重组反应,获得含干扰序列的入门载体,再将入门载体和慢病毒表达的目的载体pLenti6/...

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院