17β雌二醇对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区平滑肌细胞内游离Ca2+浓度的调节作用及机制研究

作者：汪沙; 段华^*; 张颖; 王丽平; 张恒辉; 李国力

来源：中华妇产科杂志, 2015, 50(07): 510-515.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2015.07.007

• 子宫腺肌病
• 雌二醇
• 子宫内膜
• 子宫肌层
• 肌细胞, 平滑肌
• 缝隙接合部
• 钙

目的探讨17β雌二醇(17β-E2)对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区(EMI)平滑肌细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的调节作用及可能机制。方法选择2011年9月至2012年12月在首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心因子宫腺肌病行子宫全切除术的患者28例为腺肌病组, 选择同期因子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ行子宫全切除术者31例为对照组, 对两组患者的EMI平滑肌细胞进行分离及原代培养。应用Ca2+荧光探针Fluo-4/AM负载平滑肌细胞, 采用细胞外钙阻断实验、细胞内钙释放阻断实验、细胞膜钙通道阻断实验、细胞膜钙激活钾通道阻断实验阻断引起[Ca2+]i变化的各个环节, 利用激光共聚焦显微镜观察17β-E2诱导后的两组患者EMI平滑肌细胞内[Ca2+]i的变化, 其变化程度以ΔF[Ca2+]i表示。结果 (1)在常规有Ca2+培养基中, 17β-E2诱导后腺肌病组和对照组EMI平滑肌细胞内Ca2+荧光强度均明显高于其17β-E2诱导前, 腺肌病组ΔF[Ca2+]i为384±26, 对照组ΔF[Ca2+]i为235±20, 两组比较, 差异有统计学意义(P=0.001);细胞外钙阻断实验显示, 细胞外无Ca2+时, 腺肌病组ΔF[Ca2+]i为207±17, 对照组ΔF[Ca2+]i为221±19, 两组比较, 差异无统计学意义(P=0.731)。腺肌病组ΔF[Ca2+]i在细胞外有Ca2+时明显高于无Ca2+时, 差异有统计学意义(P=0.000);而对照组两者比较, 差异无统计学意义(P=0.060)。(2)细胞内钙释放阻断实验显示, 阻断肌质网钙库上三磷酸肌醇(IP3)敏感的钙释放通道、肌质网利阿诺定(Ryanodine)受体(RyR)钙释放通道、肌质网钙泵释放后, 腺肌病组和对照组ΔF[Ca2+]i分别与其阻断前相比均明显降低(P<0.05), 且腺肌病组ΔF[Ca2+]i均明显高于对照组(P<0.05)。(3)细胞膜钙通道阻断实验显示, 阻断L-型钙通道后, 腺肌病组ΔF[Ca2+]i为211±19, 对照组为203±16, 两组比较, 差异无统计学意义(P=0.064);腺肌病组ΔF[Ca2+]i明显低于其阻断前(ΔF[Ca2+]i为384±28;P=0.001);而对照组与其处理前(ΔF[Ca2+]i为234±22)比较, 差异则无统计学意义(P=0.141)。(4)细胞膜钙激活钾通道阻断实验显示, 阻断细胞膜钙激活钾通道后, 腺肌病组ΔF[Ca2+]i为357±24, 对照组为209±19, 两组比较, 差异有统计学意义(P=0.000);腺肌病组和对照组ΔF[Ca2+]i分别与其处理前(腺肌病组ΔF[Ca2+]i为363±21, 对照组为237±20)比较, 差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 17β-E2通过内源性钙库释放Ca2+和细胞膜L-型钙通道介导的Ca2+内流导致子宫腺肌病患者EMI平滑肌细胞内游离[Ca2+]i异常增高, [Ca2+]i调节异常导致的子宫收缩功能障碍可能参与子宫腺肌病的发生、发展。

• 单位
  首都医科大学附属北京妇产医院; 北京地坛医院; 北京大学人民医院