植物中多胺含量超高效液相色谱法的建立

作者：林绍艳; 张芳; 徐颖洁

来源：南京农业大学学报, 2016, 39(03): 358-365.

• 多胺
• 超高效液相色谱
• 小麦
• 草坪草

[目的]植物体内的多胺对植物生长具有明显的促进作用,对体内抗逆能力的提高也具有重要意义。本试验基于高效液相色谱方法(HPLC),探讨了超高效液相色谱法(UPLC)测定植物中内源多胺,如腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)的含量。[方法]以小麦叶片、草坪草叶片作为试验材料,用液氮将其磨成粉末,加入冰预冷的5%(体积分数)高氯酸,涡旋混匀,置于冰浴中浸提1 h,然后4℃、15 000 g离心30 min,吸出上清液放入新的离心管中,经过衍生以后,选用色谱柱ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm×1.8μm),进行多胺含量的测定,流动相为乙腈和水(体积比为44∶56),柱温为30℃,流速为0.45 m L·min-1,等度洗脱,检测波长为230 nm,进样体积为2μL。[结果]样品中的Put、Spd和Spm保留时间分别为1.24、1.99、3.19 min,样品中的多胺测定一次可在5 min内完全分离;Put、Spd和Spm在1100μg·m L-1范围内,线性关系良好,相关系数分别为0.999 3、0.999 1、0.999 0,重复性和稳定性试验的相对标准偏差(RSD)均小于2%,说明该测定方法快速、稳定、分析精密度高。[结论]该试验方法简洁、快速、灵敏度高、重现性好,可有效测定植物中多胺的含量,为多胺在植物逆境代谢途径中的研究提供了基础。

• 单位
  作物遗传与种质创新国家重点实验室; 南京农业大学