油用牡丹ISSR-PCR反应体系的建立和优化

作者：李健; 胡永红

来源：分子植物育种, 2017, 15(08): 3129-3135.

DOI：10.13271/j.mpb.015.003129

• 油用牡丹
• ISSR-PCR
• 正交实验设计
• 反应体系优化

本研究采用L16(45)正交试验设计,对油用牡丹ISSR反应体系中的5个主要因素进行了优化,确立了ISSR-PCR的最佳反应体系:反应体系总体积20μL,含0.50 U Taq聚合酶,20 ng模板DNA,3.00 mmol/L Mg2+,0.40 mmol/L d NTPs,1.00μmol/L引物及10×PCR Buffer。基于ISSR-PCR最佳反应体系,我们共筛选出了12条多态性丰富、条带清晰稳定的引物,为油用牡丹遗传连锁图谱的构建及分子育种奠定基础。

• 单位
  中国科学院; 上海辰山植物园