铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的建立及其初步应用

作者：邵征绩; 张璐; 郑升; 陈小军; 刘华华; 邝曦; 龙治坚; 韩国辉

来源：分子植物育种, 2020, 1-18.

• 铁皮石斛(Dendrobium candidum Kimura et Migo)
• SCoT标记
• 体系
• 组培苗
• 遗传稳定性 Dendrobium candidum Kimura et Migo
• Start codon targeted polymorphism marker
• Reaction system
• Culture seedlings
• Genetic stability

为建立铁皮石斛的SCoT-PCR反应体系，本研究以8个不同增殖代的铁皮石斛组培苗为试验材料，采用正交试验设计，对影响PCR反应体系的2×Taq Master Mix混合液、引物、模板DNA的浓度进行优化，建立了铁皮石斛SCoT-PCR的最佳反应体系，筛选引物，并对1～8代的组培苗进行遗传稳定性鉴定。结果表明：铁皮石斛的SCoT-PCR最佳反应体系(20 μL)包含2×Taq Master Mix 10 μL、引物0.50 μmol/L、模板DNA 40 ng；从60条引物中筛选出19条扩增结果稳定、条带清晰的SCoT引物；所有引物在8个增殖代的16份供试材料中均能扩增出清晰、丰富而稳定的条带，...

• 单位
  重庆市农业科学院; 西南科技大学