高龄小鼠来源精原干细胞长期培养体系的建立

作者:汤瑞玲; 范立青*
来源:湖北科技学院学报(医学版), 2023, 37(03): 205-215.
DOI:10.16751/j.cnki.2095-4646.2023.03.0205

摘要

目的 建立高龄小鼠精原干细胞(SSC)体外长期培养体系。方法 将5只8月龄昆明白小鼠用于本实验,组织形态学技术评估睾丸生精状态;优化睾丸体细胞去除流程、原代和传代中饲养层与生长因子组合条件,观察小鼠SSC克隆形成、增殖与传代;细胞生物学与分子生物学技术检测小鼠SSC克隆的干细胞特征。结果 高龄小鼠睾丸精曲小管存在生精损害,PLZFPOS精原细胞数量增加;优化实验条件后富集的精原细胞数量增加,体外成功培养传代高龄小鼠SSC克隆6个月;高龄小鼠SSC克隆具有AKP活性并表达THY-1、PLZF、OCT-4等精原干细胞标记物。结论 本研究通过优化消化、富集、原代和传代培养的多个环节,成功建立高龄小鼠SSC体外长期培养体系。

  • 单位
    中南大学湘雅医学院; 基础医学院; 生殖与干细胞工程研究所; 湖北科技学院

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