摘要
志贺毒素是大肠杆菌O157:H7重要的毒力因子,是毒力最强的毒素之一。本文建立了采用膜电喷雾质谱(MESI-MS/MS)快速检测人粪便样本中志贺毒素的方法。将两种志贺毒素的特异性肽段作为检测目标物,在蛋白水平上对志贺毒素进行检测。对肽段YNDDDTFTVK(YK1)和YNEDDTFTVK(YK2)的母子离子对建立了定量检测方法,并对检测方法学进行了验证。实验结果表明方法具有良好的检测精密度、准确度以及回收率。MESI-MS/MS具有去除基质效应的能力,可对酶解后的混合蛋白样本实现直接检测,全部操作过程可在3 h内完成。方法有望推广至其它细菌毒素的检测,且有望与便携式质谱相结合实现现场快速检测。
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单位北京理工大学; 传染病预防控制国家重点实验室; 生命学院