果蝇原肌球蛋白2抗果蝇C病毒作用研究

作者:吴梦; 齐水水; 徐雯; 吴清发*
来源:基因组学与应用生物学, 2022, Z2: 2089-2098.
DOI:10.13417/j.gab.041.002089

摘要

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是研究宿主与病毒互作机制的模式生物,RNA干扰(RNA interference, RNAi)是果蝇最主要的抗病毒机制。果蝇C病毒(Drosophila C virus, DCV)是天然感染果蝇的正链RNA病毒,通过编码RNA沉默抑制子(viral suppressors of RNAi, VSR)1A蛋白(DCV1A)来抑制果蝇RNAi通路。本研究以DCV1A为诱饵蛋白,通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation, Co-IP)和质谱分析,获得了与DCV1A可能存在互作的108个靶蛋白。通过免疫共沉淀和Western blot分析,在果蝇S2细胞中验证了DCV1A与原肌球蛋白2(tropomyosin 2, TM2)存在互作。当细胞感染DCV后,细胞内Tm2的表达水平被显著诱导上调;通过RNAi干扰细胞中Tm2的表达后DCV复制水平显著增加,过表达Tm2基因后DCV复制水平有所下降。在S2细胞中共表达DCV1A和Tm2基因时,DCV1A蛋白水平显著下调,DCV复制也受到抑制。在Tm2突变型果蝇和野生型果蝇的胸腔内注射DCV,监测存活率发现,与野生型果蝇相比,Tm2基因突变体果蝇对DCV更为敏感。研究结果表明,在果蝇细胞水平和成虫水平上Tm2均发挥抑制DCV复制的作用。

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