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摘要
本发明提出一种Cyp基因敲除大鼠的培育方法及其肝微粒体的制备方法,所述Cyp基因敲除包括Cyp单基因敲除、Cyp多基因敲除。本发明方法中,首先利用CRISPR/Cas系统进行Cyp基因敲除大鼠的构建,包括敲除靶点的选择、sgRNA与Cas9mRNA的体外合成与转录、假孕母鼠的准备、单细胞胚胎的体外显微注射与移植、大鼠繁殖,最后得到纯合子Cyp基因敲除大鼠。进一步,提取所述Cyp基因敲除大鼠肝脏,经匀浆、差速离心,得到Cyp基因缺失大鼠肝微粒体。本发明还提出了Cyp基因敲除大鼠及其肝微粒体在药物代谢研究中的应用。
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