东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建

作者：秦欣欣; 孙红梅; 褚文辉; 王大涛; 郭倩倩; 章秀婷; 李春义

来源：东北农业大学学报, 2013, (09): 57-62+2.

DOI：10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2013.09.011

• 鹿茸再生
• galectin-1基因
• RNAi
• 生茸骨膜细胞 antler regeneration
• galectin-1 gene
• antlerogenic periosteal cell

构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,...

• 单位
  中国农业科学院特产研究所; 江苏科技大学; 分子生物学国家重点实验室