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摘要
目的 制备可溶性TrxA-CARD9蛋白及其临床突变型。方法 将构建好的原核系统表达质粒转化至大肠杆菌感受态细胞后，通过不同诱导条件筛选合适的表达条件。使用精氨酸辅助目的蛋白进行非变性溶解，并通过聚乙烯亚胺和硫酸铵沉淀法去除核酸和杂蛋白，最终利用阴离子交换和肝素亲和色谱柱纯化融合蛋白。结果 成功构建表达质粒并纯化融合蛋白，酶切去除TrxA标签后通过质谱鉴定其为可溶性CARD9蛋白。结论 成功实现了全长CARD9序列在原核系统中的高可溶性表达，为研究CARD9蛋白生物结构和功能提供了基础，并为寻找治疗真菌感染的潜在靶点和治疗方法提供新思路。
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单位化学化工学院; 南京大学
