大黄素对胰腺癌细胞抑癌基因P16、RASSF1A去甲基化作用研究

作者：陈亮; 郭敬强; 林胜璋

来源：肝胆胰外科杂志, 2014, 26(04): 312-316.

DOI：10.13709/j.cnki.1007-1954.2014.04.015

• 大黄素
• 胰腺癌
• 去甲基化
• 5Aza-cdR

目的研究大黄素对胰腺癌细胞Panc1抑癌基因P16、RASSF1A启动子区CpG岛的去甲基化作用,探讨大黄素是否可以逆转抑癌基因的甲基化状态,从而使抑癌基因重新表达生物活性,发挥抗癌活性。方法采用CCK8法检测不同浓度大黄素对胰腺癌细胞的生长情况,BSP检测不同浓度大黄素处理前后P16、RASSF1A基因甲基化状态的改变,并用RT-PCR和Western blotting分别检测两个抑癌基因以及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b在mRNA和蛋白的表达情况。结果大黄素以时间梯度和浓度梯度依赖性抑制Panc1细胞生长,BSP结果证实大黄素处理后可使P16、RASSF1A甲基化状态减弱,非甲基化状态增强,同时RT-PCR和Western blotting结果证实在Panc1中低表达或无表达的mRNA和蛋白表达增强或者重新表达。结论大黄素可以对胰腺癌细胞Panc1抑癌基因P16和RASSF1A发挥不同程度的去甲基化作用,使因启动子区甲基化而失表达的抑癌基因重新表达,大黄素抑制胰腺癌细胞生长可能和其具有对抑癌基因去甲基化作用有关,并且可推测大黄素发挥去甲基化作用和其可不同程度抑制甲基转移酶表达有一定关系。

• 单位
  浙江大学附属第一医院; 温州医科大学附属第二医院