摘要

目的建立人活化型TGFβRI(T204D)的转基因小鼠,并利用转基因动物模型初步研究T204D对牙齿釉质发育的影响。方法克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人T204D的全长基因,并利用缺失突变原理扩增T204D基因。运用Gateway技术将T204D基因插入Amelx启动子下游构建转基因表达载体,通过显微注射法建立T204D转基因C57BL/6小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测外源性TGFβRI基因表达。体视显微镜及扫描电镜下观察转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度和病理性磨损程度。结果构建了T204D转基因表达载体并制备转基因小鼠;转入的人T204D基因在小鼠颌骨组织中特异性表达;组织学分析显示:活化型TGFβRI转基因小鼠磨牙釉质矿化程度较野生型小鼠差。6个月龄时,与野生型小鼠相比,活化型TGFβRI转基因小鼠磨牙釉质有严重磨损。结论 TGFβRI在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。