金钱白花蛇碱溶性蛋白质的提取工艺优化及其表征

作者:谢超; 刘梦; 宋美营; 尚如霞; 裴丹; **松*; 闻崇炜*
来源:中药材, 2023, (08): 2007-2011.
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2023.08.028

摘要

目的:优化金钱白花蛇碱溶性蛋白质(bmASP)的提取工艺,并对其进行SDS-PAGE、HPLC、FTIR表征。方法:在单因素试验基础上,以提取pH、料液比、提取时间和提取温度为自变量,bmASP提取率为因变量,基于BoxBehnken组合设计对提取工艺进行响应面优化,对提取产物进行HPLC、FTIR、SDS-PAGE分析。结果:最佳提取工艺条件为:提取pH 8.0,料液比1:40(g/mL),提取时间5.0 h,提取温度45℃,bmASP提取率为5.96%。HPLC结果表明bmASP的保留时间为2.998、4.745、4.977、5.672 min;FTIR结果表明bmASP在3 551.45、3 575.95、3 413.06cm-1等处有特征吸收峰;SDS-PAGE指纹I图谱结果表明bmASP分子量介于18.4~116 kDa,其中18.4~19.5 kDa、23.38~25.11 kDa、32.53~38.64 kDa、58.62~65.96 kDa的蛋白质含量丰富。结论:bmASP提取工艺的响应面模型可靠有效,结果稳定,可为金钱白花蛇药效物质基础的研究、资源开发利用及真伪鉴定提供实验依据。

全文