犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析

作者：姚凌云; 王晶宇; 欧阳伟; 钱晶; 吴世妍; 夏兴霞; 诸玉梅; 王晓丽; 潘群兴; 芮荣; 王永山

来源：中国动物传染病学报, 2018, 26(02): 59-63.

• 重组犬干扰素α2
• 原核表达系统
• 抗病毒活性

本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-28a-Ca IFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 k Da的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%。包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组Ca IFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/m L。本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础。

• 单位
  江苏省农业科学院; 农业部