弓形虫GRA1基因在毕赤酵母菌中的表达、纯化与鉴定

作者：谢荣华; 舒衡平; 范久波; 蒋立平; 谭逵; 张琼; 吴翔

来源：中国病原生物学杂志, 2008, (12): 909-913.

DOI：10.13350/j.cjpb.2008.12.010

• 弓形虫
• GRA1
• 毕赤酵母
• 基因表达

目的研究弓形虫致密颗粒抗原-1(GRA1)在毕赤酵母菌中的表达,获得高效表达的具有生物学活性的目的蛋白。方法将已构建重组的pPIC9K-GRA1质粒转化入酵母菌GS115,筛选His+Muts表型转化子,摇瓶培养,1%甲醇诱导表达。表达产物经高效液相色谱法纯化后,测定其生物学活性。结果诱导4d的蛋白表达量达到2.5g/L。SDS-PAGE显示表达蛋白的分子质量单位为24ku,Westernblot鉴定表达产物具有抗原性。表达蛋白经高效液相色谱纯化产物后纯度达到90%以上。结论弓形虫GRA1基因在毕赤酵母中成功分泌表达目的蛋白,表达产物具有抗原性。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 湖南环境生物职业技术学院