摘要
[目的]观察三七重楼生化汤(Sanqi Chonglou Shenghua Decoction,SCD)对L929成纤维细胞增殖、黏附、迁移及愈合相关蛋白表达的影响,并探讨其机制。[方法]常规培养L929成纤维细胞,随机分为SCD低、中、高浓度组及对照组,SCD各浓度组予不同浓度SCD(1.25、2.5、5mg·m L-1),对照组予等体积培养基,以实时细胞分析技术(real time cellular analysis,RTCA)、细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)分别检测细胞增殖、黏附能力,划痕实验检测细胞迁移情况,Western blot检测血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(phospho-extracellular regulated protein kinases 1/2,p-ERK1/2)蛋白表达。[结果]SCD促进成纤维细胞增殖,且呈动态变化。RTCA示:SCD干预12~24h,中、高浓度促进细胞增殖(P<0.01),但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CCK-8结果示:SCD干预24h,低、中、高浓度组均促进细胞增殖(P<0.01)。与低浓度组比较,中、高浓度组促增殖作用更显著(P<0.01)。与中浓度组比较,高浓度组促增殖作用更显著(P<0.05)。SCD促进成纤维细胞迁移。干预24h,中、高浓度组促进细胞迁移(P<0.05,P<0.01),且高浓度组促进作用更显著(P<0.01)。干预36h,低、中、高浓度SCD均具有促进迁移的作用(P<0.05,P<0.01)。与低浓度组比较,中、高浓度促进作用更显著(P<0.05,P<0.01)。与中浓度组比较,高浓度组促进迁移作用更显著(P<0.01)。SCD促进成纤维细胞黏附(P<0.01),但不同浓度间差异无统计学意义(P>0.05)。SCD高浓度组可上调成纤维细胞VEGF、p-ERK1/2的表达(P<0.01),但SCD不影响TGF-β1表达(P>0.05)。[结论]SCD可通过促进成纤维细胞增殖、黏附和迁移,并促进VEGF蛋白表达,从而发挥促进剖宫产瘢痕愈合的作用,其机制可能与ERK信号通路激活有关。
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单位第二临床医学院; 浙江中医药大学