感染唐鱼的草鱼呼肠孤病毒分离与鉴定

作者：吴江; 赵现锋; 陈兵; 安微; 孙洁; 林彦星; 王津津; 廖立珊; 赵永刚; 兰文升^*

来源：中国动物检疫, 2023, 40(06): 31-37.

• 唐鱼
• 草鱼呼肠孤病毒
• Illumina高通量测序技术

广东省某渔场待出境送检唐鱼(Tanichthys albonubes)样品，经病理检查未发现临床症状，取样品的肝、脾和肾等器官组织，用细胞分离培养方法检测病毒性因子，发现该批次唐鱼样品的组织提取物能够造成EPC和CHSE-214细胞发生细胞病变效应(CPE)，确定该样品携带病毒性病原。为探究唐鱼携带病原的种类，针对草鱼呼肠孤病毒(GCRV)S9核酸片段设计特异性引物，对产生CPE的细胞培养物进行RT-PCR核酸扩增和序列测定，用EPC细胞扩增该病毒，获得病毒含量为106.25 TCID50/mL的细胞培养物，通过高通量测序技术分析细胞培养物中的病毒类型，并用不同病毒含量的细胞培养物进行唐鱼感染性试验。测序结果经BLAST比对分析发现，扩增序列与GCRV 873株的S9核苷酸序列同源性达98%，鉴定病原为GCRV，将其命名为GCRV SZ0508株。全基因组测序序列注释为GCRV，通过vp2基因遗传进化分析发现，GCRV SZ0508属于I型GCRV。感染性试验中，感染组100%被感染，死亡率为3.3%，表明分离的GCRV能够感染唐鱼，具有造成唐鱼发生草鱼出血病的风险。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心; 深圳海关动植物检验检疫技术中心