摘要
目的研究miR-29a是否调节MMP2的表达参与前列腺癌DU145细胞的迁移、侵袭和增殖过程。方法通过实时荧光定量(qRT-PCR)和免疫印迹法(WB)检测在正常前列腺上皮RWPE-1细胞和激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞内miR-29a、MMP2 mRNA和蛋白的表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-29a与MMP2 3′-UTR的调控关系。miR-29a mimics(模拟剂)、 miR-29a inhibitor(抑制剂)和miR-NC (对照)转染DU145细胞后分组为、miR-29a mi模拟组、miR-29a in抑制组和miR-NC对照组,检测各组细胞中miR-29a、MMP2 mRNA和蛋白的表达;细胞划痕实验和侵袭实验(Transwell小室)检测各组细胞迁移和侵袭;增殖实验(CCK-8)实验检测各组细胞增殖。结果与RWPE-1细胞相比,DU145细胞中miR-29a的表达减少、MMP2 mRNA和蛋白的表达增加。miR-29a模拟剂转染细胞后,miR-29a表达升高,MMP2表达降低;miR-29a抑制剂转染细胞后,miR-29a表达降低,MMP2表达升高。双荧光素酶实验验证了MMP2为miR-29a的靶基因。MiR-29a过表达能抑制DU145细胞的迁移、侵袭和增殖;MiR-29a抑制表达能促进DU145细胞的迁移、侵袭和增殖。结论在前列腺癌DU145细胞中,miR-29a调节MMP2的表达,进而参与细胞的迁移、侵袭和增殖过程。
-
单位河南科技大学第一附属医院; 河南科技大学