维甲酸对高氧暴露下原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞和成纤维细胞增殖与凋亡的影响

作者：***; 常立文; 容志惠; 王华; 卢红艳; 汪鸿; 刘伟

来源：细胞生物学杂志, 2007, 29(1): 115-121.

DOI：10.3969/j.issn.1674-7666.2007.01.023

• 高氧
• 维甲酸
• 肺泡Ⅱ型上皮细胞
• 肺成纤维细胞
• 凋亡
• 增殖

探讨高氧暴露对原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)、成纤维细胞(LFs)增殖和凋亡的影响以及维甲酸(RA)的保护作用机制.通过建立高氧暴露原代培养的胎鼠AECⅡ和LFs模型,以RA作为干预方式,采用流式细胞术(膜联蛋白V-PI双标记)检测AECⅡ和LFs凋亡,Western印迹检测AECⅡ增殖细胞核抗原(PCNA)、p53及caspase-3表达和LFs PCNA表达.结果发现:(1)与空气对照比较,高氧暴露12 h,膜联蛋白v(+)PI(-)和膜联蛋白V(+)PI(+)标记AECⅡ数均显著升高(14.41±1.15 vs 2.80±0.19,P＜0.01;61.07±3.06 vs 1.49±0.11,P＜0.01);RA对空气暴露下AECⅡ坏死、凋亡无明显影响,但明显下调高氧暴露下膜联蛋白V(+)PI(-)和膜联蛋白V(+)PI(+)标记AECⅡ数(8.04±0.79 vs 14.41±1.15,P＜0.01;27.57±2.32 vs 61.07±3.06,P＜0.01).(2)高氧、RA对LFs坏死、凋亡无明显影响.(3)高氧暴露12 h,明显降低AECⅡ PCNA表达(P＜0.01),显著提高其p53(P＜0.01)和caspase-3活性片段(P＜0.01)表达;RA显著上调高氧暴露下AECⅡ PCNA表达(P＜0.01),下调其p53和caspase-3活化片段表达(P＜0.01).(4)高氧、RA对LFs PCNA表达无明显影响.由此提示,高氧暴露,导致AECⅡ大量凋亡、坏死,增殖受到抑制,同时,LFs所受影响较小,两种细胞对高氧暴露的差异性行为可能是导致未成熟肺组织异常重构的重要原因;RA通过降低AECⅡ凋亡、坏死从而对高氧肺损伤具有保护作用.

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院