摘要

目的 观察益气解毒方药物血清对人肾细胞癌ACHN细胞凋亡及Notch信号通路中Notch1基因的影响。方法 选择健康雌性SD大鼠,随机分为4组,每组8只:空白血清组(0.9%氯化钠注射液10 ml·kg-1·d-1灌胃),益气解毒方高浓度血清组(益气解毒方煎剂50 g·kg-1·d-1灌胃),益气解毒方中浓度血清组(益气解毒方煎剂25 g·kg-1·d-1灌胃),益气解毒方低浓度血清组(益气解毒方煎剂12.5 g·kg-1·d-1灌胃),均在10 d后提取大鼠血清。取对数生长期的ACHN细胞分别以上述4组血清进行培养,CCK-8法检测各组ACHN细胞的增殖情况,流式细胞术检测各组ACHN细胞的凋亡情况,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组ACHN细胞Notch1 mRNA的表达情况。结果 益气解毒方高浓度、中浓度、低浓度血清组及空白血清组24 h ACHN细胞的抑制率分别为(12.34±4.25)%、(7.47±1.40)%、(2.52±0.62)%、(1.05±0.31)%(F=15.04,P<0.01),48 h的抑制率分别为(24.20±2.41)%、(14.23±1.56)%、(5.08±1.34)%、(1.16±0.14)%(F=227.36,P<0.01),72 h的抑制率分别为(32.16±2.45)%、(25.05±3.69)%、(10.29±2.76)%、(1.07±0.71)%(F=110.51,P<0.01),同一时间段四组间两两比较,均P<0.01,表明益气解毒方药物血清能够明显抑制ACHN细胞的增殖,呈剂量依赖性;且益气解毒方高浓度(F=31.44,P<0.01)、中浓度(F=49.61,P<0.01)、低浓度血清组(F=68.78,P<0.01)中各时间点的抑制率差异均有统计学意义,呈时间依赖性。益气解毒方高浓度、中浓度、低浓度血清组及空白血清组细胞凋亡率依次为(34.5±1.5)%、(24.4±1.5)%、(13.1±0.5)%、(5.2±0.3)%,差异有统计学意义(F=1 153.36,P<0.01);益气解毒方高浓度、中浓度、低浓度血清组及空白血清组Notch1 mRNA相对表达水平分别为0.213±0.032、0.432±0.049、0.781±0.018、1.013±0.047,差异有统计学意义(F=270.60,P<0.01)。结论 益气解毒方药物血清可以诱导ACHN细胞凋亡,其机制可能与下调Notch1受体的表达有关。