固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及CCSP的影响

作者：姜越; 张宇林; 董盈妹; 严花; 赵霞^*

来源：南京中医药大学学报(自然科学版), 2022, 38(06): 483-489.

DOI：10.14148/j.issn.1672-0482.2022.0483

• 固本防哮饮
• 哮喘缓解期
• 上皮屏障
• 紧密连接蛋白
• CCSP

目的 研究固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及Clara细胞分泌蛋白(CCSP)的影响，探讨其防治缓解期哮喘的可能机制。方法 联合使用卵清蛋白(OVA)及呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)建立哮喘缓解期小鼠模型，将36只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、固本防哮饮低剂量组、固本防哮饮中剂量组、固本防哮饮高剂量组和孟鲁司特钠组，每组6只。模型建立完成后，固本防哮饮各剂量组分别予不同剂量(12、24、36 g·kg-1)固本防哮饮，孟鲁司特钠组予2.6 mg·kg-1孟鲁司特钠，各组均灌胃28 d。末次给药后24 h留取样本。使用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肺组织病理；Western blot、qPCR及免疫组化检测各组小鼠肺组织中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)等气道上皮紧密连接蛋白表达；ELISA法检测肺组织及肺泡灌洗液(BALF)中CCSP的表达。结果 HE染色结果显示，与正常组相比，模型组小鼠肺组织中可见明显的炎性细胞浸润(P<0.01),固本防哮饮中、高剂量组小鼠肺组织中炎性细胞浸润减少(P<0.05,P<0.01);与正常组相比，模型组中ZO-1、闭合蛋白(Occludin)和桥粒芯胶蛋白(Desmocollin)的蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),免疫组化结果显示上述指标蛋白在模型组中表达减少(P<0.01,P<0.001)且排列松散，固本防哮饮各剂量组对上述蛋白表达有不同程度地回调；同时，模型组中ZO-1、ZO-2、纽带蛋白(Vinculin)、连环蛋白(Catenin) mRNA的表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),固本防哮饮高剂量组ZO-1、ZO-2、Vinculin、Catenin mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与正常组相比，模型组小鼠肺组织及BALF中CCSP的表达显著下降(P<0.01),低、高剂量固本防哮饮显著增加肺组织及BALF中CCSP的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 固本防哮饮能够上调气道上皮紧密连接蛋白以及CCSP的表达水平，修复上皮损伤，恢复上皮屏障功能，从而防治哮喘。

• 单位
  南京中医药大学