微小RNA-30d-5p通过葡萄糖调节蛋白78调控骨髓基质细胞成骨分化的机制

作者：李光; 李杰; 张平^*

来源：解剖学报, 2023, 54(02): 195-201.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2023.02.010

• 骨形成
• 成骨分化
• 矿化
• 微小RNA-30d-5p
• 实时定量聚合酶链反应

目的 探讨微小RNA(miR)-30d-5p对骨髓基质细胞成骨分化和凋亡的影响及其作用机制。方法 将骨髓基质细胞分为miR-30d-5p过表达阴性对照组、miR-30d-5p过表达组、miR-30d-5p抑制阴性对照组和miR-30d-5p抑制组。碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨效果，茜素红染色检测钙结节沉淀情况，TUNEL检测凋亡水平。Real-time PCR、Western blotting检测mRNA和蛋白表达水平，生物信息学分析网站Targetscan 7.1预测miR-30d-5p的潜在结合位点。结果 MiR-30d-5p过表达后，细胞成骨分化能力和矿化能力均降低(P<0.05),而细胞凋亡水平升高(P<0.05)。葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和成骨特异性Runt相关转录因子2(RUNX2)蛋白表达均显著降低(P<0.05)。但是，miR-30d-5p抑制剂处理细胞后，细胞成骨分化能力和矿化能力均有提升(P<0.05),细胞凋亡水平降低(P<0.05)。GRP78和RUNX2蛋白水平均升高(P<0.05)。MiR-30d-5p结合位点位于GRP78基因3’UTR的142～148 bp处。结论 MiR-30d-5p通过下调GRP78蛋白的表达抑制骨髓基质细胞成骨分化，并且促进细胞凋亡。

• 单位
  天津医科大学; 基础医学院