T7噬菌体衣壳蛋白P11的原核表达、纯化及其单克隆抗体的制备

作者：陈亮; 高云英; 王华茂; 徐蓉; 刘素霞; 李宗海

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2008, (05): 482-483+490.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004681

• T7噬菌体
• P11蛋白
• 原核表达
• 单克隆抗体 T7 bacteriophage
• P11 protein
• prokaryotic expression
• monoclonal antibody

目的:表达、纯化T7噬菌体衣壳蛋白P11,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆并表达T7噬菌体P11蛋白,其氨基端带有6-His标签。纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功表达了P11蛋白。SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为27000。获得了1株稳定分泌抗P11抗体的杂交瘤细胞株(2G11),其分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG2b。ELISA检测,对应腹水mAb的效价为1∶8.1×105。Western blot结果显示抗P11mAb具有良好的特异性。结论:成功地制备了P11蛋白及其mAb。

• 单位
  癌基因与相关基因国家重点实验室; 上海市肿瘤研究所; 西北农林科技大学