报告基因方法监测重金属汞及其化合物的早期毒性

作者：余占江; 杨秦; 杨晓达; 王夔

来源：中国中药杂志, 2006, (16): 1346-1349.

DOI：10.3321/j.issn:1001-5302.2006.16.013

• 热休克蛋白
• HeLa细胞
• 重金属
• 报告基因 heat shock protein
• HeLa cell
• heavy metals
• reporter gene

目的:基于热休克信号响应和分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因,建立HSE-SEAP-HeLa细胞模型,预测重金属(汞及其化合物)的早期毒性。方法:将pHSE-SEAP质粒转染到人子宫颈癌HeLa细胞中,建立瞬时HSE-SEAP响应模型。热休克(42℃,1 h)或重金属化合物(CdCl2,5μmol.L-1,4 h)处理后,在完全DMEM培养基中恢复48 h后,检测细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量(表示该状态下细胞中的热休克蛋白表达量),同时用MTT方法检测对应浓度下的细胞活性,以验证模型的有效性和重复性。并用亚致死浓度(由MTT实验确定)的无机和矿物汞(HgCl2,HgS和朱砂)和柳硫汞...

• 单位
  北京大学; 天然药物与仿生药物国家重点实验室