桃甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术体系的建立

作者：蔡志翔; 沈志军; 严娟; 马瑞娟; 俞明亮

来源：江苏农业科学, 2016, (11): 43-45.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.11.012

• 桃
• DNA甲基化
• MSAP
• 体系优化

为建立适合桃的甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplification polymorphism,简称MSAP)反应体系,以桃PCM-1R、PCM-1G为材料,对MSAP技术中的关键因素进行优化。结果表明,500 ng基因组DNA用EcoRⅠ、HapⅡ或MspⅠ各10 U(0.5μL,2 000 U/m L),37℃保温12 h,即可酶切完全;25μL选择性扩增体系中,含有2μL10倍稀释的预扩增产物、各1μL上下游引物、2.5μL 10×Taq buffer、2.5μL d NTP mix(各0.2 mmol/L)、2.5μL25 mmol/L MgCl_...

• 单位
  江苏省农业科学院