5HRE增强子和hTERT启动子联合调控CDX2基因对裸鼠移植瘤的抑制作用

作者：祁杰; 郑见宝; 孙学军; 王孝珑; 余钧辉; 吴云桦; 高琪; 王恺; 贺赛

来源：山西医科大学学报, 2017, 48(03): 246-250.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2017.03.010

• 基因治疗载体
• 结肠癌
• 裸鼠
• 移植瘤
• CDX2
• Ki-67

目的探讨5HRE增强子和hTERT启动子联合调控CDX2基因对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为结肠癌生物治疗提供实验依据。方法将复苏前期筛选的稳定表达pLVX-hTERTp-CDX2-3FLAG(hC)的LoVo细胞(hC/LoVo)、空LoVo细胞、稳定表达pLVX-5HRE-hTERTp-3FLAG(5Hh)的LoVo细胞(5Hh/LoVo)及转染pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)的LoVo细胞(5HhC/LoVo),接种各组细胞制备裸鼠皮下移植瘤模型,观察构建的载体对LoVo细胞移植瘤生长的影响;免疫组化法观察移植瘤CDX2和Ki-67的表达情况。结果成功复苏转染5HhC的LoVo细胞及各组对照LoVo细胞。各组裸鼠皮下接种肿瘤细胞后均成功致瘤,成瘤率为100%;5HhC组种植瘤生长速度显著低于其他组(P<0.05);终点时间第18天时,5HhC组裸鼠皮下种植瘤的体积明显小于其他各组(P<0.05);5HhC组种植瘤质量为(0.20±0.16)g,明显低于hC/LoVo组(0.34±0.21)g,空LoVo细胞组(0.61±0.19)g及5Hh/LoVo组(0.55±0.27)g(P<0.05);5HhC组种植瘤中CDX2表达为(87±7)%,明显低于hC/LoVo组(55±4)%,空LoVo细胞组(15±3)%及5Hh/LoVo组(17±5)%(P<0.05);5HhC组种植瘤中Ki-67表达为(7±7)%,明显低于hC/LoVo组(13±2)%,空LoVo细胞组(38±5)%及5Hh/LoVo组(85±9)%(P<0.05)。结论构建的双靶向调控载体5HhC可以抑制结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的生长。

• 单位
  陕西省人民医院; 西安交通大学第二附属医院; 陕西省肿瘤医院; 西安交通大学第一附属医院