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摘要
目的 探讨乙酰紫堇灵（Ace）对大鼠脊髓损伤（SCI）后功能恢复的作用和机制。方法 使用脊髓撞击仪制备SD大鼠中度挫伤性SCI模型（SCI组），给予不同浓度Ace(10、20、40 mg/kg)腹腔注射干预，以假手术大鼠（Sham组）为对照。通过BBB评分评估SCI大鼠运动功能恢复情况；利用HE染色观察脊髓组织损伤面积变化；采用PCR、ELISA与免疫荧光染色评估脊髓损伤后体内炎症水平（TNF-α、IL-6、IL-1β）变化和小胶质细胞的活化情况（CD11b/CD68）。使用脂多糖（LPS组，100 ng/mL）诱导小胶质细胞BV2活化，分别给予不同浓度Ace处理（Ace组，1、2、4μmol/L）,Control组给予等体积DMSO处理。免疫荧光和PCR验证Ace对BV2活化及炎症因子分泌的作用；利用网络药理学预测Ace抑制小胶质细胞活化的靶点蛋白和信号机制，采用AutoDock软件对Ace与预测的靶点蛋白进行分子对接。使用信号通路阻断剂（Osimertinib），在体干预SCI大鼠模型，体外干预LPS诱导的BV2细胞模型，以验证信号机制。结果 大鼠体内实验显示，与SCI组相比，Ace组大鼠BBB评分增高、脊髓损伤面积减小、小胶质细胞活化数量和促炎因子水平减少（P<0.05）；体外LPS刺激BV2细胞的研究结果显示，Ace组BV2活化及炎症因子水平显著低于对照组（P<0.05）。网络药理学预测EGFR是Ace的主要作用靶点，分子对接技术显示EGFR与Ace的结合能为-8.9 kJ/mol，二者之间存在连接氢键；免疫印迹证实Ace可抑制脊髓组织及BV2细胞中EGFR/MAPK信号通路活化，加入EGFR抑制剂Osimertinib干预后，其抑制效能与Ace相当。结论 Ace可能通过调控EGFR/MAPK通路抑制小胶质细胞介导的炎症反应，从而促进脊髓损伤后组织修复和运动功能恢复，为SCI治疗药物选择提供新的方向。
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单位蚌埠医学院; 中心实验室; 蚌埠医学院第一附属医院
