经典和高致病性PRRSV疫苗株嵌合病毒的构建及其免疫原性分析

作者：张武超; 冷超粮; 张洪亮; 陈家锃; 白云; 张秋月; 彭金美; 刘永刚; 童光志; 田志军; 蔡雪辉

来源：中国预防兽医学报, 2015, 37(04): 241-245.

• 猪繁殖与呼吸综合征
• 嵌合病毒
• ORF1a
• ORF1b
• ORF2-7

为研究经典和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗株间的生物学差异,本实验以经典PRRSV疫苗株CH-1R的全长感染性克隆p CH-1R为骨架,利用反向遗传操作技术分别将其ORF1a、ORF1b和ORF2-7替换为HP-PRRSV Hu N4-F112的相应片段,构建3个全长c DNA嵌合质粒。将构建的3个重组c DNA质粒经体外转录后转染BHK-21细胞,并于Marc-145细胞中传代,拯救出3种嵌合病毒,分别命名为r CH-1R-T1a、r CH-1R-T1b和r CH-1R-T27。病毒一步生长曲线结果表明,3种嵌合病毒在Marc-145细胞中的生长特性与亲本病毒CH-1R基本一致;动物实验结果显示,嵌合病毒实验组血清中PRRSV N蛋白抗体阳转率分别为3/3(r CH-1RT1a)、2/3(r CH-1R-T1b)和1/3(r CH-1R-T27),而CH-1R免疫组血清N蛋白抗体检测始终为阴性。以上结果表明,HP-PRRSV Hu N4-F112非结构蛋白在N蛋白抗体产生中起关键辅助或协同作用。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 吉林农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室