摘要

目的:以糖尿病小鼠(db/db)为研究对象,比较单一使用AMD3100与AMD3100联合粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating,G-CSF)及两者不同使用顺序对骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的动员效果,为临床获取糖尿病人EPCs进行细胞治疗提供思路。方法:采用AMD3100、重组人粒细胞集落刺激因子注射液(recombinant human granulocyte colony-stimulating,rh G-CSF)参考国内外文献所述剂量和方法进行骨髓EPCs的动员。选用56周雄性小鼠,随机将80只db/db小鼠分为A组(AMD3100+NS动员组),B组(AMD3100+G-CSF动员组),C组(G-CSF+AMD3100动员组)和D组(NS空白对照组);80只db/+小鼠为相应对照组,分组对应为A’组,B’组,C’组和D’组。每组在动员后第3、7、10、14天4个时间点于心脏部位取外周血,流式细胞仪检测CD34+/CD133+/Flk-1+细胞的比例。结果取平均值用均值±标准差(单位%)表示,统计学方法处理后进行比较和分析。结果:(1)D组和D’组在动员后第3、7、10、14天4个时间点,CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例无差异(P>0.05),但D’组中CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例高于D组(P=0.003)。(2)A组、B组和C组db/db小鼠在动员后第3、7、10、14天4个时间点,CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例逐渐上升,A组至第7天达到峰值,随后逐渐下降;B组和C组至第10天达到峰值,随后逐渐下降,且在达到峰值时CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例与其余3个时间点相比差异有意义(P=0.000)。在第10天,B组和C组db/db小鼠外周血中CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例较A组和D组高(P=0.000),但B组和C组db/db小鼠外周血中CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例之间的差异无统计学意义(P>0.05)。(3)A’组、B’组和C’组db/+小鼠在动员后第3、7、10、14天4个时间点,CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例逐渐上升,至第7天达到高峰,随后逐渐下降,且在第7天CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例与其余3个时间点相比差异有意义(P=0.000)。在达到峰值的第7天,C’组CD34+/CD133+/Flk-1+细胞比例较A’组、B’组和D’组高(P=0.000)。结论:AMD3100联合G-CSF动员骨髓EPCs的效果优于单一使用AMD3100的动员效果,在非糖尿病状态下,先使用G-CSF再联合AMD3100的动员作用更优,但在糖尿病状态下先使用AMD3100再联合G-CSF的动员作用更优。

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