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摘要
目的:观察脑信号蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及两者的荧光共定位情况,为明确Sema4C和GIPC在亚细胞水平的相互作用提供佐证。方法:将Sema4C的基因编码区全长、胞外段和胞内段分别构建到pEGFPN1和pEGFPC1表达载体中,将GIPC编码区基因构建到pDsRed-C1表达载体中,分别转染HEK293细胞,观察亚细胞定位;将pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分别共转染HEK293和COS7细胞,观察两者的荧光共定位情况。结果:酶切鉴定及测序结果表明重组载体构建正确,Sema4C蛋白全长和胞外段呈跨膜分布,而胞内段在全细胞中呈弥散样分布;GIPC在胞浆内呈斑块状聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在荧光共定位区域。结论:Sema4C主要在胞膜和胞浆内表达,GIPC主要在胞浆内呈斑块样聚集分布;Sema4C和GIPC之间存在荧光共定位。
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单位军事医学科学院基础医学研究所
